中科院碩士論文：轉基因大豆導致水產動物肌體炎癥！

中科院碩士論文：轉基因大豆導致水產動物肌體炎癥！

作者：過路道人

核心提示：中國科學院研究生院（海洋研究所）的碩士論文：《飼料中轉基因成分檢測及對水產動物安全性評價的初步研究》及相關論文《進口轉基因大豆（Roundup Ready）對吉富羅非魚生長和生理的影響》指出，將含有30%轉基因豆粕的羅非魚飼料,飼喂羅非魚，僅僅經過數小時后，轉基因大豆中的外源基因片段能在胃腸道中檢出，四周后的檢測則發現已經侵入到了羅非魚肌體內部，7周后則導致羅非魚肌體內部產生炎癥！研究顯示，在羅非魚心臟、肝臟、腸、胃、卵巢、精巢、腦、鰓絲、脾臟、膽囊、肌肉等不同部位的DNA中都能檢測到外源基因的存在。該研究還指出，采用巢式PCR檢測方法對市場上的豆制品進行檢測，結果發現，市場上有46.5%的豆制品被檢測出含有轉基因成分。

另外，根據中科院網站的報道稱，由海洋生物技術研究與開發中心劉梅、王雷等承擔的青島市科技發展項目“轉基因作物檢測及安全性評價方法的研究”通過驗收和成果鑒定。從成果的內容判斷，該成果的核心內容與這篇碩士論文的主要研究內容非常一致。報道指出，該項目首次研究了轉基因大豆對羅非魚生理生化指標的影響、轉基因大豆中外源基因在羅非魚各組織中的分布以及外源基因在養殖水體微生物間的漂流。鑒定委員一致認為，研究成果總體達到國際先進水平。

中國科學院碩士論文：飼料中轉基因成分檢測及對水產動物安全性評價的初步研究

作者：陶冉

信息來源一：

中國科學院碩士論文：飼料中轉基因成分檢測及對水產動物安全性評價的初步研究

http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-80068-2008117269.htm

信息來源二：

與本論文相關的、由論文作者發表的相關論文之一：攝食轉基因大豆羅非魚各組織中轉基因成份的檢測研究

http://www.chemdrug.com/databases/7_36_gpwncsxmdgwemxsm.html

信息來源三：

與本論文相關的、由論文作者發表的相關論文之二：進口轉基因大豆（Roundup Ready）對吉富羅非魚生長和生理的影響 http://www.doc88.com/p-74762740168.html

【摘要】： 自轉基因作物問世以來,轉基因產品的安全性問題一直是人們關注的焦點。本文根據GenBank中登錄的轉基因大豆完整外源DNA序列設計了幾對引物,對轉基因大豆進行了巢式PCR檢測。結果表明,巢式PCR可以擴增10-10g/μl濃度的DNA溶液,檢測靈敏度高達0.01%。該巢式PCR技術具有高度特異性、靈敏度和很好的重復性。用巢式PCR對部分市售的水產飼料和豆制食品進行檢測,90.6%的水產飼料和46.5%的食品能檢測出外源基因片段,表明轉基因大豆廣泛存在于水產飼料和我們的日常食品中,為食品安全分析和管理提供了方法和依據。環介導的等溫擴增技術(LAMP)依賴于能夠識別靶序列上6個特異區域的引物和一種具有鏈置換特性的DNA聚合酶,在等溫條件下可高效、快速、高特異地擴增靶序列。本研究建立了轉基因大豆的LAMP擴增技術,針對豆制品以及飼料的轉基因LAMP檢測技術正在研究和開發中。 利用轉基因和非轉基因豆粕制作的飼料,喂養吉富羅非魚,分別于4周、7周取樣,對其體重和血液指標進行了檢測。實驗顯示,投喂轉基因飼料7周以后,增重率和血清指標,轉基因組與非轉基因飼料組相比沒有顯著差異。全血指標中白細胞數目、大血小板比率、平均血小板體積和血小板體積分布寬度4項指標顯著高于非轉基因飼料組,而且差異達到極顯著水平。由以上結果可見,轉基因大豆與非轉基因大豆相比,對羅非魚的一些生理過程造成了一定的影響,但是并未對其生長造成可見的影響。分別于投喂1h、4h和8h以后取羅非魚胃內容物、腸道內容物和糞便,并分別于4周、7周和繼續饑餓2周后,取羅非魚不同組織,提取DNA,用巢式PCR法檢測轉基因大豆中的外源基因在各種組織中的分布,結果顯示在胃內容物、腸內容物、糞便、心臟、肝臟、胃、腸、卵巢、精巢、腦、鰓絲、脾臟、膽囊、肌肉等不同部位的DNA中都能檢測到外源基因的存在,說明轉基因大豆中的外源DNA并不能被羅非魚的消化道完全降解,其DNA片段可能通過消化吸收轉移到魚體的各種組織。在投喂轉基因飼料7周以后以及停止投喂饑餓2周以后分離水體中的微生物,提取其DNA,進行轉基因檢測。結果顯示在所分離純化的各種微生物中都沒有檢測到轉基因大豆中外源基因35S-EPSPS的存在。

【關鍵詞】：轉基因大豆 檢測 巢式PCR 羅非魚 安全性評價

【學位授予單位】：中國科學院研究生院（海洋研究所）

【學位級別】：碩士

【學位授予年份】：2008

【分類號】：S963

【目錄】：

中文摘要5-6

Abstract6-8

引言8-9

1 前言9-27

1.1 全球轉基因作物的發展現狀9-10

1.2 轉基因作物的安全性問題10-14

1.3 轉基因檢測技術的研究進展14-20

1.4 巢式PCR(nested PCR)和環介導的等溫擴增技術(LAMP)簡介20-22

1.5 本研究的必要性、主要內容和意義22-27

2 轉基因作物及水產飼料的檢測27-39

2.1 材料和方法27-33

2.2 結果和分析33-39

3 含有轉基因成分的飼料對水產動物安全性評價的初步研究39-51

3.1 材料和方法39-40

3.2 結果和分析40-51

4 結論和討論51-59

4.1 樣品DNA 提取方法51

4.2 轉基因作物及其產品的PCR 檢測51-53

4.3 轉基因大豆的 LAMP 檢測53-54

4.4 轉基因飼料的檢測54

4.5 轉基因飼料對羅非魚生長和生理的影響54-56

4.6 轉基因大豆外源基因在羅非魚體內各組織器官的殘留以及在養殖水體微生物的漂移56-59

5 實驗總結59-60

5.1 創造性成果59

5.2 存在的問題與建議59-60

參考文獻60-68

發表論文目錄68-69

致謝69

附文一：進口轉基因大豆（Roundup Ready）對吉富羅非魚生長和生理的影響

 http://www.doc88.com/p-74762740168.html

附文二：轉基因作物檢測及安全性評價方法研究取得進展

http://www.cas.cn/ky/kyjz/200802/t20080204_1028997.shtml

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